In a sintesi tipica di DNA, RNA è acidi nucleici non naturali, u passu di Deprotection and Coupling ghjucà un rolu cruciale.
U passu di Deprotection hè di sguassà u gruppu DMT nantu à u supportu solidu o u gruppu hydroxyl 5' nantu à u nucleoside precedente cù l'acidu urgànicu, è espose u gruppu hydroxyl per u prossimu passu di accoppiamentu.L'acidu trichloroacetic 3% in dichloromethane o toluene hè soprattuttu utilizatu per fà u passu di deprotection.A cuncentrazione di l'acidu trichloroacetic è u tempu di deprotection (tempu di deblocking) domina a purità di i prudutti finali.A bassa cuncentrazione è u tempu di deblocking insufficiente lascia u gruppu DMT senza reazione, chì diminuite u rendiment è aumentanu l'impurità indesiderate.U longu tempu di deblocking pò guidà a depurine di sequenze sintetizzate, furmendu l'impurità inespettate.
U passu di Coupling hè sensibile à u cuntenutu di l'acqua di i solventi è l'umidità in l'aria.A cuncentrazione di l'acqua in a sintesi deve esse menu di 40 ppm, megliu menu di 25 ppm.Per mantene a cundizione di sintesi anidra, a sintesi di l'acidi nucleici deve esse realizatu in un ambiente di bassa umidità, cusì ricumandemu à i nostri clienti di utilizàAmidites Dissolved Equipment, chì ponu dissolve a fosforamidita in polvere o oliu in acetonitrile anhydrous per evità u cuntattu cù l'aria.
Siccomu a dissolve di phosphoramidites hè megliu à a situazione senza acqua, è trappule molecolari per adsorbe l'acqua traccia in i reagenti è amidite, hè bisognu di preparà uTrappule moleculari.Consigliamo 2 g di sottovaso per i flaconi di reagenti da 50-250 ml, 5 g per i flaconi di reagenti da 250-500 ml, 10 g per i flaconi di reagenti da 500-1000 ml e 20 g per i flaconi di reagenti da 1000-2000 ml.
A dissolve di phosphoramidites deve esse realizatu sottu l'atmosfera inerte, è a rimpiazzamentu di reagenti attivatori è acetonitrile deve esse finitu in u tempu.I reagenti di Capping and Oxidation deve esse utilizatu u più prestu pussibule, i reagents aperti dà menu vita di conservazione, è menu attività durante a sintesi.
Tempu di Postu: Aug-09-2022